Serum memiliki sejumlah protein. Pada tahun 1937, Arne W Tiselius memperkenalkan metode pemisahan protein yang berbeda dalam medan listrik.
Dalam elektroforesis, protein dipisahkan dalam medan listrik. Belakangan, elektroforesis zona dalam kertas atau selulosa asetat dikembangkan. Pada tahun 1952, metode dua tahap dikembangkan yang menggabungkan elektroforesis dengan imunodifusi. Setelah itu C Williams, P Graber dan M Poulik memperkenalkan metode klasik Immunoelectro phoresis (di mana elektroforesis dan imunodifusi ganda dilakukan pada slide yang dilapisi agar-agar yang sama).
1. Elektroforesis Zona:
Protein dapat dipisahkan berdasarkan muatan listrik permukaannya. Media pendukung inert seperti kertas, selulosa asetat atau agar digunakan untuk pemisahan. Sampel serum ditempatkan pada media pendukung. Media pendukung kemudian dihubungkan ke kutub positif dan negatif dari alat elektroforesis. Di bawah medan listrik, protein diisi dan bergerak melintasi media pendukung. Gerakan mereka tergantung pada muatan listrik mereka.
Karena molekul protein yang berbeda memiliki muatan yang berbeda, mereka berpindah ke posisi yang berbeda dalam media pendukung. Biasanya elektroforesis dilakukan selama 60-120 menit atau lebih. Kemudian protein diwarnai dan diperiksa secara visual atau dipindai dalam densitometer. Pemindaian densitometer dari fraksi protein yang dipisahkan dan diwarnai mengubah setiap pita menjadi pola menjadi puncak karakteristiknya dan membantu dalam kuantisasi setiap fraksi protein.
2. Elektroforesis Protein Serum:
Serum manusia normal dipisahkan menjadi lima pita elektroforetik utama: albumin, α 1 -globulin, α 2 -globulin, β-globulin dan y-globulin (Gbr. 27.5).
Elektroforesis zona berguna dalam diagnosis penyakit manusia tertentu:
Gambar 27.5A sampai C:
Elektroforesis pada strip selulosa asetat dan pemindaian densitometer strip kertas selulosa asetat: A dan A1: Pita protein serum normal pada strip asetat seluler divisualisasikan setelah pewarnaan (A) dan pemindaian densitometer dari strip selulosa asetat (A1).
B dan B1: Hipergammaglobulinemia
C dan C1: Hipogammaglobulinemia
saya. Multiple myeloma dan makro-globulinemia Waldenstrom. Pada penyakit ini, lonjakan protein yang dibatasi secara elektroforesis biasanya terjadi di wilayah γ-globulin. Lonjakan mewakili akumulasi imunoglobulin monoklonal. Imunoglobulin monoklonal memiliki muatan permukaan yang ditentukan, dan karenanya dihasilkan lonjakan (sedangkan, pola normal imunoglobulin poliklonal menghasilkan apusan di wilayah y-globulin).
- Hipogammaglobulinemia (penurunan nyata dalam serum gamma globulin).
aku aku aku. Hipoproteinemia (penurunan yang nyata pada semua protein serum).
- Hipoalbuminemia:
Pengurangan albumin, yang terjadi pada banyak penyakit hati dan ginjal.
- Elektroforesis urin membantu mendeteksi rantai ringan imunoglobulin bebas, seperti protein Bence-Jones.
- Zona elektroforesis cairan serebrospinal (CSF) membantu dalam diagnosis multiple sclerosis dan gangguan sistem saraf pusat lainnya. Elektroforesis protein serum dianggap sebagai uji skrining untuk mendeteksi kelainan protein. Analisis lebih lanjut diperlukan untuk menemukan kelainan spesifik.