Prinsip Kerja Mikroskop Fluoresensi (Dengan Gambar)



Baca artikel ini untuk mempelajari cara kerja mikroskop fluoresensi!

Prinsip bekerja:

Banyak zat menyerap cahaya. Namun beberapa di antaranya, setelah menyerap cahaya dengan panjang gelombang dan energi tertentu, memancarkan cahaya dengan panjang gelombang lebih panjang dan energi lebih rendah.

Zat semacam itu disebut ‘zat neon’.

Penerapan fenomena ini adalah dasar dari mikroskop fluoresensi. Dalam praktiknya, mikroba diwarnai dengan pewarna fluoresen dan kemudian disinari dengan cahaya biru. Pewarna menyerap cahaya biru (panjang gelombang lebih pendek) dan memancarkan cahaya hijau (panjang gelombang lebih panjang).

Dalam mikroskop fluoresensi, lampu busur merkuri intensitas tinggi digunakan sebagai sumber cahaya (Gambar 4.11). Itu memancarkan cahaya putih, yang dilewatkan melalui ‘filter pembangkit’. Itu hanya memungkinkan komponen biru dari cahaya putih (cahaya putih terdiri dari tujuh warna, yang dalam urutan panjang gelombang yang menurun adalah ungu, nila, biru, hijau, kuning, oranye dan merah) untuk melewatinya dan menghalangi semua lainnya. komponen warna.

Cermin dichroic, yang memantulkan cahaya biru, tetapi memungkinkan cahaya hijau digunakan di jalur cahaya biru. Cermin dipasang pada sudut sedemikian rupa sehingga cahaya biru dipantulkan ke bawah ke spesimen.

Spesimen sebelumnya diwarnai dengan pewarna fluoresen, seperti acridine orange NO, acridine yellow, acriflavine, thioflavine S, thioflavine T atau titan yellow G. Bagian tertentu dari spesimen mempertahankan pewarna, sementara yang lain tidak. Bagian-bagian yang mempertahankan pewarna fluoresen menyerap cahaya biru dan memancarkan cahaya hijau. Cahaya hijau yang dipancarkan naik dan melewati cermin dichroic. Ini memantulkan kembali cahaya biru, jika ada, dan hanya membiarkan cahaya hijau melewatinya.

Kemudian, cahaya mencapai ‘filter penghalang’. Ini memungkinkan cahaya hijau masuk ke mata dan menghalangi sisa cahaya biru dari spesimen, yang mungkin tidak sepenuhnya dipantulkan oleh cermin dichroic.

Dengan demikian, mata merasakan bagian spesimen yang diwarnai sebagai objek hijau bercahaya dengan latar belakang hitam legam, sedangkan bagian spesimen yang tidak diwarnai tetap tidak terlihat.

Related Posts