Berbagai Bahan Kimia dan Media yang digunakan di Laboratorium Mikrobiologi

Berbagai Bahan Kimia dan Media yang Digunakan di Laboratorium Mikrobiologi!

Di laboratorium, bakteri ditumbuhkan pada zat kaya nutrisi yang disebut ‘media’. Berbagai media juga diperlukan untuk penggunaan tertentu.

Komponen media ditimbang dalam proporsi tertentu, dicampur dalam jumlah air yang dibutuhkan dan disterilkan dalam autoklaf. Bakteri diinokulasi ke dalamnya dan dibiarkan tumbuh.

Menimbang bahan media adalah pekerjaan yang membosankan dan beberapa bahan mungkin terlewatkan tanpa disadari. Untuk mengatasi kesulitan tersebut, kini tersedia media siap pakai dalam bentuk bubuk.

Media ini mengandung semua bahan dalam proporsi yang ditentukan. Untuk media bubuk dalam jumlah tertentu (seperti yang disebutkan pada label kemasan), ditambahkan air dalam jumlah tertentu dan disterilkan.

Media budaya adalah dari jenis berikut:

I. Media yang Ditetapkan Secara Kimiawi:

Media yang didefinisikan secara kimia atau media sintetis adalah media, di mana semua bahan kimia tertentu (molekul dan atom) dan konsentrasinya dapat ditentukan. Bahan kimia tersebut dapat berupa H ₂ 0, NaCl, Na ₂ S0 ₄ , KCI dan agar. Contoh: kaldu sintetik anorganik, kaldu garam glukosa.

II. Media Kompleks:

Media kompleks adalah media, di mana semua bahan kimia tertentu (molekul dan atom) dan konsentrasinya tidak dapat ditentukan. Untuk bakteri yang rewel, beberapa zat kompleks, seperti ekstrak daging sapi, ekstrak ragi, dan pepton digunakan dalam media, yang komposisi kimianya (molekul dan atom) sangat bervariasi dan tidak diketahui. Media ini terutama digunakan untuk pertumbuhan bakteri yang banyak. Contoh: kaldu nutrisi dan agar nutrisi.

AKU AKU AKU. Media Khusus:

Media ini digunakan untuk tujuan tertentu, bukan hanya untuk pertumbuhan bakteri.

Berdasarkan tujuan penggunaan, mereka adalah dari jenis berikut:

1. Media Selektif:

Mereka adalah media yang mengandung komposisi bahan tertentu, yang mendukung pertumbuhan beberapa bakteri target dan menghambat pertumbuhan yang lain. Mereka digunakan untuk mengisolasi kelompok bakteri tertentu.

Ketika sekelompok bakteri tertentu tumbuh dalam media selektif, ia memanifestasikan karakteristik koloni yang khas, yang membantu dalam deteksi dan pencacahannya dalam berbagai sampel. Bakteri tertentu yang menarik, ditemukan sebagai koloni terisolasi diambil untuk tes lebih lanjut untuk identifikasi dikonfirmasi. Terkadang, media selektif juga digunakan sebagai media diferensial.

Contoh media selektif diberikan di bawah ini:

(a) Agar MacConkey:

Ini digunakan untuk menumbuhkan spesies bakteri gram negatif. Kristal violet yang digunakan dalam media menghambat pertumbuhan bakteri gram positif, sementara membiarkan spesies gram negatif tumbuh.

(b) Agar EMB:

Eosin metilen biru agar (agar EMB) digunakan untuk menumbuhkan spesies bakteri gram negatif. Ini sebagian menghambat pertumbuhan bakteri gram positif, yang karenanya spesies bakteri gram negatif tumbuh lebih banyak di dalamnya. Hal ini juga digunakan dalam identifikasi enterik coli dari Escherichia coli, yang tumbuh di atasnya sebagai koloni biru-hitam dengan kemilau hijau metalik.

Coliform enterik lainnya, seperti Enterobacter aerogenes, tumbuh di atasnya sebagai koloni yang tebal, mukoid, dan berwarna merah muda. Selain penghasil laktosa ini, penghasil laktosa juga tumbuh di atasnya, tetapi sebagai koloni tidak berwarna, yang mengambil warna ungu media.

(c) Agar Garam Manitol:

Ini digunakan untuk menumbuhkan Staphylococcus spp. Konsentrasi garam yang tinggi (7,5% NaCl) hadir dalam media menghambat pertumbuhan sebagian besar bakteri lainnya. Ini juga membedakan Staphylococcus menjadi Staphylococcus yang memfermentasi manitol, yang tumbuh dengan zona kuning di sekitar koloni dan Staphylococcus yang tidak memfermentasi manitol, yang tumbuh tanpa perubahan warna.

2. Media Diferensial:

Mereka adalah media tempat bakteri yang berbeda tumbuh sebagai koloni, dengan karakteristik visual yang berbeda.

Contoh media diferensial diberikan di bawah ini:

(a) Agar MacConkey:

Pada media ini, bakteri usus normal non-patogen yang merupakan peragi laktosa tumbuh sebagai koloni berwarna merah, sedangkan bakteri usus patogen yang merupakan non-fermentor laktosa tumbuh sebagai koloni yang tidak berwarna.

(b) Agar Darah:

Darah adalah konstituen penting dari media ini. Ini adalah bahan pengayaan untuk bakteri rewel seperti Streptococcus spp.

Ini digunakan untuk membedakan sifat-sifat streptokokus untuk menghasilkan berbagai jenis hemolisis darah sebagai berikut:

(i) α-hemolisis:

Di sini, terjadi penghancuran sebagian sel darah merah, menghasilkan zona warna hijau di sekitar koloni karena reduksi hemoglobin menjadi methaemoglobin.

(ii) β-hemolisis:

Di sini, terjadi hemolisis lengkap sel darah merah, menghasilkan zona bening di sekitar koloni. Hemolisis ini disebabkan oleh dua jenis hemolisin, yaitu ‘streptolisin O’, yang merupakan enzim labil oksigen antigenik dan ‘streptolisin S’, yang merupakan lisin stabil oksigen non-antigenik.

(iii) y-hemolisis:

Di sini, tidak terjadi hemolisis, sehingga tidak ada zona di sekitar koloni.

3. Media Transportasi:

Mereka adalah media yang digunakan untuk transportasi singkat bakteri, di mana pertumbuhan tidak diinginkan. Media tersebut hanya mengandung buffer dan garam. Media tidak mengandung sumber C, N dan faktor pertumbuhan lainnya. Ini mencegah pertumbuhan mikroba.

4. Media Pengayaan:

Mereka adalah media, di mana proporsi relatif dari bakteri target diperkaya, karena mengandung nutrisi untuk bakteri target, sedangkan yang lain tidak. Misalnya, tinja mengandung jumlah Salmonella dan Shigella yang sangat rendah.

Untuk mengisolasinya, pertama-tama mereka dibiakkan dalam kaldu selenite atau kaldu GN (gram-negatif), di mana hanya Salmonella dan Shigella yang tumbuh subur, sementara yang lain tidak tumbuh dan tetap dalam fase lag. Kemudian digoreskan pada media padat untuk mendapatkan koloni Salmonella dan Shigella.

5. Media yang Diperkaya:

Mereka adalah media yang digunakan untuk mendukung pertumbuhan maksimum jenis bakteri.

6. Media Biokimia:

Media ini digunakan untuk menguji aktivitas biokimia bakteri, yang membantu dalam identifikasi mereka. Daftar media biokimia penting yang digunakan dalam uji biokimia yang dilakukan untuk identifikasi berbagai bakteri diberikan di bawah ini.