Percobaan untuk mengukur ukuran mikroorganisme di bawah mikroskop!
Tujuan:
Mikrometri (mikro: mikroskopis, metri: pengukuran) adalah pengukuran dimensi benda-benda mikroskopis yang meliputi panjang, lebar, diameter, dan tebal. Mikroorganisme adalah benda mikroskopis, karena tidak terlihat oleh mata telanjang dan hanya dapat diamati di bawah mikroskop.
Sangat sering, diperlukan untuk mengukur dimensi mereka dalam hal panjang, lebar dan diameter. Karena ukurannya yang kecil, pengukuran dimensinya harus dilakukan di bawah mikroskop. Jadi, tujuan mikrometri adalah untuk mengukur dimensi mikroorganisme di bawah mikroskop.
Prinsip:
Pengukuran dimensi mikroorganisme dilakukan di bawah mikroskop dengan bantuan dua skala mikro yang disebut ‘mikrometer’. Kedua mikrometer memiliki kelulusan mikroskopis yang terukir di permukaannya. Salah satunya, ‘mikrometer okular’ adalah piringan kaca bundar, yang cocok dengan rak bundar di dalam lensa mata.
Ini memiliki kelulusan sewenang-wenang terukir di permukaannya. Namun, jarak antara kelulusan tergores adalah konstan untuk mikrometer okular tertentu. Mikrometer lainnya, yang disebut ‘mikrometer panggung’, adalah slide kaca khusus, yang dijepitkan ke panggung mikroskop. Ini memiliki kelulusan standar terukir di permukaannya, yang terpisah 10 µ.
Kalibrasi:
Dengan menggunakan tujuan yang diperlukan, gradasi pada mikrometer okular dikalibrasi terhadap gradasi standar pada mikrometer panggung. Kalibrasi diperlukan, karena jarak antara kelulusan mata bervariasi tergantung pada tujuan yang digunakan, yang menentukan ukuran lapangan.
Untuk kalibrasi, kedua etsa mikrometer ditumpangkan dengan memutar lensa okuler. Jumlah divisi okular (OD) bertepatan dengan jumlah tahap divisi (SD) ditemukan.
Dari sini, faktor kalibrasi untuk satu divisi okular (OD) dihitung sebagai berikut:
Jika 10 OD bertepatan dengan 2 SD, maka
10 OD = 2 SD = 2 x 10 µ = 20 µ (… 1 SD = 10 µ)
1 OD = 20/10 µ = 2 µ
Dengan demikian, jarak antara dua etsa okular yang berdekatan adalah 2 µ (yaitu faktor kalibrasi adalah 2 µ).
Pengukuran:
Setelah kalibrasi, mikrometer panggung dipindahkan dan mikroba, yang dimensinya akan diukur, ditempatkan di atas panggung pada slide dan difokuskan. Sekarang, jumlah divisi okular yang ditempati oleh mikroorganisme dihitung. Kemudian, dengan mengalikan jumlah divisi ini dengan faktor kalibrasi, ukuran mikroba ditentukan sebagai berikut.
Jika panjang mikroba menempati 6 OD, maka panjang mikroba = 6 x faktor kalibrasi = 6 x 2 = 12 µ.
Dimungkinkan untuk mengukur ukuran mikroba dengan mengamatinya secara langsung pada mikrometer panggung. Ini akan menghindari kalibrasi dan perhitungan. Tetapi mikrometer panggung adalah skala standar, yang mahal karena goresan mikro di atasnya. Jika sering digunakan untuk pengamatan langsung, goresannya akan luntur.
Selain itu, etsa pada mikrometer panggung memiliki jarak yang lebih lebar (sekitar 10 kali) dibandingkan pada mikrometer okular. Dengan demikian, dimensi tidak dapat ditentukan secara tepat dengan mikrometer panggung. Itulah mengapa; itu tidak pernah digunakan untuk pengukuran langsung.
Bahan yang Dibutuhkan:
Mikrometer okular, mikrometer panggung, slide, mikroskop, mikroba.
Prosedur:
- Lensa mata dilepas dari mikroskop, dan tutup atasnya dibuka. Tutupnya dilepas. Dengan hati-hati, lensa mata (Gambar 5.15) dilepas. Mikrometer okular (sepotong kaca berukir melingkar, yang dimasukkan ke dalam potongan mata) ditempatkan dengan hati-hati ke dalam lensa mata. Lensa mata ditempatkan kembali dan tutup atas disekrup ke kondisi aslinya. Lensa mata ditempatkan kembali di mikroskop.
- Mikrometer panggung dijepitkan ke panggung dan etsa dipusatkan dengan menggerakkan panggung mekanis.
- Sasaran berdaya rendah dibawa ke posisinya.
- Lensa okuler diputar hingga etsa pada kedua mikrometer bertumpuk.
- Tujuan yang disyaratkan diambil ke posisi. Tujuan yang diperlukan adalah bahwa, dengan menggunakan seluruh mikroorganisme dapat dilihat dan mencakup bidang mikroskopis semaksimal mungkin.
- Dengan posisi objektif yang diinginkan (untuk objektif perendaman minyak, setetes minyak diletakkan di atas mikrometer panggung) panggung mekanis dipindahkan, sehingga garis pada mikrometer panggung berimpit dengan garis pada mikrometer okular. Kemudian, garis lain dicari pada mikrometer okular, yang berhimpitan dengan garis lain pada mikrometer panggung. Jumlah pembagian antara garis yang bertepatan dihitung untuk kedua mikrometer.
- Faktor kalibrasi untuk tujuan yang digunakan dihitung.
- Dengan cara yang sama, faktor kalibrasi dihitung untuk tujuan lainnya.
- Mikrometer panggung dilepas.
- Slide berisi mikroba yang akan diamati diletakkan di atas panggung dan difokuskan.
- Jumlah bagian mata yang ditutupi oleh mikroba dihitung dengan melihat melalui lensa mata.
- Ukuran mikroorganisme ditentukan dengan mengalikan jumlah pembelahan mata yang dicakup oleh mikroba dengan faktor kalibrasi.
Pengamatan:
