Kloning Gen: Langkah Utama yang Terlibat Dalam Kloning Gen!
“Transfer nuklir sel somatik” atau hanya “transfer nuklir”, Ini membutuhkan dua jenis sel. Salah satunya adalah sel somatik, yang dikumpulkan dari hewan yang akan dikloning, yang metode kloning paling umum dikenal sebagai “donor genetik”.
Sel somatik adalah sel apa pun selain sel sperma atau sel telur, dan mengandung DNA lengkap, atau cetak biru genetik, dari hewan asalnya. Untuk tujuan kloning, sel somatik biasanya diperoleh dengan biopsi kulit rutin yang dilakukan oleh dokter hewan.
Sel yang diperlukan untuk kloning adalah sel telur, yang dikumpulkan dari betina dari spesies yang sama (dikenal sebagai “donor telur”). Di laboratorium, seorang ilmuwan mengekstraksi dan membuang inti sel telur, yaitu bagian sel yang mengandung gen donor sel telur. Seseorang kemudian memasukkan sel somatik dari donor genetik ke dalam sel telur dan “menyatukan” keduanya dengan listrik. Akibatnya telur yang menyatu mengandung DNA donor genetik.
Simulasi ilmiah dari sel telur yang menyatu, “mengaktifkan” sel telur dan menyebabkannya membelah seperti sel telur, jika telah dibuahi oleh sel sperma dalam reproduksi konvensional. Telur yang telah diaktifkan kemudian ditempatkan dalam media kultur. Saat pembelahan sel berlanjut selama beberapa hari, sebuah blastokista (embrio tahap awal) terbentuk.
Setelah sekitar satu minggu, spesialis transfer embrio memindahkan blastokista ke betina penerima (terkadang disebut sebagai “ibu pengganti”) di mana ia terus berkembang. Setelah kehamilan cukup bulan, penerima melahirkan hewan yang pada dasarnya adalah kembar identik dari donor genetik.
Langkah-langkah utama yang terlibat dalam kloning gen adalah:
(i) Persiapan DNA pembawa (DNA vektor).
(ii) Isolasi gen yang diinginkan.
(iii) Penyisipan gen yang diisolasi ke dalam vektor yang menghasilkan rDNA.
(iv) Transformasi rDNA menjadi inang yang sesuai.
(v) Ekspresi rDNA yang merupakan gen hasil kloning.
Gambar berwarna 7.1 (a), (b), (c), (d) dan (e) menggambarkan kreasi Dolly. Sel yang diambil dari ambing domba betina Finn Dorset ditempatkan dalam biakan dengan konsentrasi nutrisi yang sangat rendah. Karena kelaparan, sel berhenti membelah dan mematikan gen aktif mereka.
Sementara itu, sel telur yang tidak dibuahi diambil dari seekor domba betina Scottish Blackface. Nukleus (dengan DNA-nya) disedot keluar, meninggalkan sel telur kosong yang berisi semua mesin seluler yang diperlukan untuk menghasilkan embrio.
Kedua sel ditempatkan bersebelahan dan pulsa elektrik menyebabkan keduanya melebur menjadi satu seperti gelembung sabun. Denyut kedua meniru ledakan energi pada pembuahan alami, memulai pembelahan sel. Setelah sekitar enam hari, embrio yang dihasilkan ditanamkan ke dalam rahim domba betina Blackface lainnya.
Setelah masa kehamilan, Blackface betina yang hamil melahirkan bayi domba Finn Dorset, bernama Dolly yang secara genetik identik dengan donor aslinya. Proses yang dioperasikan manusia untuk mengekstraksi DNA dari sel inang dan menanamkannya untuk berfungsi di jenis sel lain.
