Baca artikel ini untuk mempelajari tentang Teknik Prinsip Fluoresensi-antibodi untuk mendeteksi bakteri tertentu dalam sampel!
Bertujuan untuk mempelajari prinsip imunofluoresensi atau teknik fluoresensi-antibodi untuk mendeteksi bakteri tertentu dalam sampel.
Teknik fluoresensi-antibodi atau imunofluoresensi adalah prosedur yang cepat dan andal untuk mendeteksi bakteri tertentu dalam sampel. Sejumlah antibodi, diberi label dengan pewarna fluoresen, seperti fluorescein isocyanate atau isothiocyanate, masing-masing khusus untuk bakteri tertentu tersedia.
Salah satu dari antibodi berlabel ini, khusus untuk bakteri tertentu yang akan dideteksi, ditambahkan dalam tetes ke apusan yang difiksasi dengan panas dari sampel bakteri yang tidak diketahui pada kaca objek dan dioleskan dengan lembut ke permukaan apusan. Kertas saring yang dibasahi ditempatkan di dalam cawan petri.
Kemudian, slide ditempatkan di dalamnya pada batang kaca berbentuk U dan diinkubasi pada suhu 25°C selama 35 menit. Antibodi berlebih pada apusan dibersihkan dengan saline buffer fosfat 1%. Slide direndam ke dalam Coplin jar berisi 1% phosphate-buffered saline pada 25°C selama 10 menit. Slide dikeringkan dengan kertas bibulous. Satu tetes gliserol ditambahkan ke apusan. Itu ditutupi dengan slip penutup dan diperiksa di bawah mikroskop fluoresensi.
Jika bakteri spesifik untuk antibodi berlabel yang digunakan ada dalam sampel bakteri yang tidak diketahui, kompleks antigen-antibodi terbentuk (di sini bakteri adalah antigennya). Karena antibodi ditandai dengan zat fluoresen, kompleks antigen-antibodi memancarkan fluoresensi, bila diamati di bawah mikroskop fluoresensi. Jika bakteri spesifik untuk antibodi tidak ada, antibodi fluoresen akan hilang dan fluoresensi tidak diamati.
