Uji Katalase pada Bakteri untuk Mengetahui Kemampuannya Mendegradasi Hidrogen Peroksida (Dengan Gambar)

Uji Katalase pada Bakteri untuk Mengetahui Kemampuannya Mendegradasi Hidrogen Peroksida (Dengan Gambar)!

Prinsip:

Beberapa bakteri memiliki kemampuan untuk mendegradasi hidrogen peroksida (H ₂ 0 ₂ ) menjadi air (H ₂ O) dan oksigen (0, →), karena dapat menghasilkan enzim ‘katalase’.

Pemecahan hidrogen peroksida oleh katalase ditunjukkan dengan gelembung gas oksigen bebas (0, →).

Dalam tes katalase, satu lingkaran bakteri uji dimasukkan ke dalam setetes hidrogen peroksida yang diambil pada kaca objek. Jika bakteri memiliki kemampuan untuk menghasilkan katalase, ia memecah hidrogen peroksida (H ₂ O ₂ ) menjadi air dan oksigen. Produksi oksigen menghasilkan gelembung atau buih, yang dapat terlihat pada tetesan.

Bahan yang Dibutuhkan:

Slides, bibulous paper, inoculating loop, bunsen burner, laminar flow chamber, hidrogen peroksida (3%), koloni terisolasi atau biakan murni bakteri.

Prosedur:

1. Slide dibersihkan di bawah air keran (Gambar 7.18).

2. Slide diseka dengan kertas bibulous dan dikeringkan dengan udara.
3. Setetes hidrogen peroksida (3%) diambil di tengah slide.
4. Sebuah ose dari bakteri uji diambil secara aseptik, sebaiknya dalam ruang aliran laminar, dengan bantuan ose yang disterilkan dengan api dan dimasukkan ke dalam tetesan hidrogen peroksida pada slide. Loop disterilkan setelah setiap inokulasi.

Pengamatan:

1. Gelembung atau buih terjadi pada tetesan: Katalase positif.
2. Tidak terjadi gelembung atau buih pada tetesan: Katalase negatif.

Tindakan pencegahan:

Kultur bakteri dari media agar darah tidak dapat digunakan untuk uji katalase, karena darah mengandung katalase dan selalu memberikan hasil positif. Bakteri katalase negatif cenderung mati dalam media bebas gula baik karena menghasilkan H ₂ 0 ₂ atau karena H ₂ 0 ₂ terakumulasi dalam media, ketika terkena udara dan cahaya.

Oleh karena itu, biakan stok bakteri tersebut harus disimpan dalam gelap dan di mana akses ke udara terbatas. Katalase ditemukan pada hampir semua bakteri yang dapat tumbuh secara aerobik. Karena enzim hanya diproduksi oleh bakteri yang hidup, biakan yang berumur lebih dari 24 jam tidak dapat digunakan untuk uji katalase.